РЕЗИМЕ И ОБЈАШЊЕЊЕ ТЕСТ
Маларија је хемолитичка, фебрилна болест коју преносе комарци и која зарази преко 200 милиона људи и убије више од милион људи годишње.Узрокују га четири врсте плазмодијума: П. фалципарум, П. вивак, П. овале и П. малариае.Сви ови плазмодији инфицирају и уништавају људске еритроците, изазивајући језу, грозницу, анемију и спленомегалију.П. фалципарум изазива теже болести од других плазмодијалних врста и узрокује већину смрти од маларије.П. фалципарум и П. вивак су најчешћи патогени, међутим, постоје значајне географске варијације у дистрибуцији врста.
Традиционално, маларија се дијагностикује демонстрацијом организама на густим размазима периферне крви обојеним по Гиемзи, а различите врсте плазмодијума се разликују по изгледу у инфицираним еритроцитима.Техника је способна за тачну и поуздану дијагнозу, али само када је изводе квалификовани микроскописти користећи дефинисане протоколе, што представља велике препреке за удаљена и сиромашна подручја света.
Брзи тест маларије Пф/Пв Аг је развијен за решавање ових препрека.Користи антитела специфична за П. фалципарум Хистидин богат протеин-ИИ (пХРП-ИИ) и за П. вивак лактат дехидрогеназу (Пв-ЛДХ) да би истовремено открио и разликовао инфекцију са П. фалципарум и П. вивак.Тест може да уради необучено или минимално обучено особље, без лабораторијске опреме
ПРИНЦИП
Малариа Пф/Пв Аг Рапид Тест је хроматографски имунотест са латералним протоком.Компоненте за тестирање траке се састоје од: 1) коњугатног јастучића боје бордо боје који садржи мишје анти-Пв-ЛДХ антитело коњуговано са колоидним златом (Пв-ЛДХ-златни коњугати) и мишје анти-пХРП-ИИ антитело коњуговано са колоидним златом (пХРП-ИИ-златна коњугата), 2) тест нитрозел траке са нитро-ћелијском траком, 2) контролни опсег (Ц банд).Пв трака је претходно обложена другим мишјим анти-Пв-ЛДХ специфичним антителом за детекцију Пв инфекције, Пф трака је претходно обложена поликлоналним анти-пХРП-ИИ антителима за детекцију Пф инфекције, а Ц трака је обложена козјим антимишјим ИгГ.
Током теста, адекватна запремина узорка крви се дозира у бунар за узорке (С) тест касете, пуфер за лизу се додаје у бунар за пуфер (Б).Пуфер садржи детерџент који лизира црвена крвна зрнца и ослобађа различите антигене, који мигрирају капиларним деловањем преко траке која се држи у касети.Пв-ЛДХ ако је присутан у узорку ће се везати за коњугате Пв-ЛДХ-злато.Имунокомплекс се затим хвата на мембрану претходно обложеним анти-Пв-ЛДХ антителом, формирајући Пв траку бордо боје, што указује на Пв позитиван резултат теста.Алтернативно, пХРП-ИИ ако је присутан у узорку ће се везати за пХРП-ИИ-златне коњугате.Имунокомплекс се затим хвата на мембрану претходно обложеним анти-пХРП-ИИ антителима, формирајући Пф траку бордо боје, што указује на позитиван резултат теста на Пф.Одсуство тестних трака указује на негативан резултат.Тест садржи интерну контролу (Ц трака) која треба да покаже бордо обојену траку имунокомплекса коњугата козјег анти-мишјег ИгГ / мишјег ИгГ (анти-Пв-ЛДХ и анти-пХРПИИ)-злата без обзира на развој боје на било којој од тест трака.У супротном, резултат теста је неважећи и узорак мора бити поново тестиран другим уређајем.
