РЕЗИМЕ И ОБЈАШЊЕЊЕ ТЕСТ
Маларија је хемолитичка, фебрилна болест коју преносе комарци и која зарази преко 200 милиона људи и убије више од милион људи годишње.Узрокују га четири врсте плазмодијума: П. фалципарум, П. вивак, П. овале и П. малариае.Сви ови плазмодији инфицирају и уништавају људске еритроците, изазивајући језу, грозницу, анемију и спленомегалију.П. фалципарум изазива теже болести од других плазмодијалних врста и узрокује већину смрти од маларије.П. фалципарум и П. вивак су најчешћи патогени, међутим, постоје значајне географске варијације у дистрибуцији врста.
Традиционално, маларија се дијагностикује демонстрацијом организама на густим размазима периферне крви обојеним Гиемзом, а различите врсте плазмодијума се разликују по изгледу у инфицираним еритроцитима1.Техника је способна за тачну и поуздану дијагнозу, али само када је изводе квалификовани микроскописти користећи дефинисане протоколе2, што представља велике препреке за удаљена и сиромашна подручја света.
Малариа Пф / Пан Антиген Рапид Тест Кит је развијен за решавање ових препрека.Тест користи пар моноклонских и поликлоналних антитела на специфични протеин П. фалципарум, хистидин Репеат Протеин ИИ (пХРП-ИИ) и пар моноклонских антитела на плазмодијум лактат дехидрогеназу (пЛДХ), протеин који производе четири врсте плазмодијума и на тај начин омогућавају откривање било које врсте плазмодијума и различитих инфекција и симултане инфекције. од остала три плазмодија.Може га изводити необучено или минимално обучено особље, без лабораторијске опреме.
ПРИНЦИП
Пф/ Пан Малариа Рапид Тест комплет је хроматографски имунотест са латералним протоком.Компоненте тест траке састоје се од: 1) коњугата боје бордо боје који садржи мишје анти- пХРП-ИИ антитело коњуговано са колоидним златом (пХРП ИИ-златни коњугати) и мишје анти-пЛДХ антитело коњуговано са колоидним златом (пЛДХ-златни коњугати),
2) трака са нитроцелулозном мембраном која садржи две тестне траке (Пан и Пв траке) и контролну траку (Ц трака).Пан трака је претходно обложена моноклонским анти-пЛДХ антителом помоћу којег се може детектовати инфекција било којом од четири врсте плазмодија, Пф трака је претходно обложена поликлоналним анти-пХРП-ИИ антителима за детекцију Пф инфекције, а Ц трака је обложена козјим антимишјим ИгГ.
Током теста, адекватна запремина узорка крви се дозира у бунар за узорке (С) тест касете, пуфер за лизу се додаје у бунар за пуфер (Б).Пуфер садржи детерџент који лизира црвена крвна зрнца и ослобађа различите антигене плазмодијума, који мигрирају капиларним деловањем преко траке која се држи у касети.пХРП-ИИ ако је присутан у узорку ће се везати за пХРП ИИ-златне коњугате.Имунокомплекс се затим хвата на мембрану претходно обложеним анти-пХРПИИ антителима, формирајући Пф траку бордо боје, што указује на позитиван резултат теста на Пф.пЛДХ ако је присутан у узорку ће се везати за коњугате пЛДХ злата.Имунокомплекс се затим хвата на мембрану претходно обложеним антипЛДХ антителом, формирајући Пан траку бордо боје, што указује на позитиван резултат теста на плазмодијум.У одсуству Пан траке, може се препоручити позитиван резултат теста за било коју од остала три плазмодија.
Одсуство тестних трака (Пан и Пф) указује на негативан резултат.Тест садржи интерну контролу (Ц трака) која треба да покаже бордо обојену траку имунокомплекса козјег анти-мишјег ИгГ / мишјег ИгГ (пХРП-ИИ и пЛДХ-златни коњугати) без обзира на развој боје на било којој од тест трака.У супротном, резултат теста је неважећи и узорак мора бити поново тестиран другим уређајем.
